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上海通蔚小鼠ELISA試劑盒使用方法
更新時間:2024-07-29   點擊次數:594次

小鼠ELISA試劑盒實驗操作注意要點:

血清標本宜在新鮮時檢測。如有細菌污染,菌體中可能含有內源性HRP,也會產生假陽性反應。如在冰箱中保存過久,其中的可發生聚合,在間接法ELISA中可使本底加深。一般說來,在5天內測定的血清標本可放置于4℃,超過一周測定的需低溫冰存。凍結血清融解后,蛋白質局部濃縮,分布不均,應充分混勻宜輕緩,避免氣泡,可上下顛倒混和,不要在混勻器上強烈振蕩。

混濁或有沉淀的血清標本應先離心或過濾,澄清后再檢測。反復凍融會使抗體效價跌落,所以測抗體的血清標本如需保存按小鼠ELISA試劑盒說明書的要求準備實驗中需用的試劑。ELISA中用的蒸餾水或去離子水,包括用于洗滌的,應為新鮮的和高質量的。自配的緩沖液應用pH計測量較正。

小鼠ELISA試劑盒使用方法:

1、血漿:EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。

2、細胞上清液:1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

3、組織勻漿:將組織加入適量鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液。

4、血清:操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血紅細胞迅速小心地分離。

5、保存:如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

對于科研人員來說小鼠ELISA試劑盒原理和操作步驟并不陌生,不外乎固定抗原,添加一抗、二抗和底物,操作過程中夾雜著洗滌和封閉步驟。如果操作不合理,也會很大程度上影響實驗的準確度。實驗結束時我們是否能獲得有意義而且準確的信息,這在很大程度上取決于操作結果的正確與否。

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上海通蔚生物科技有限公司

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